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脯氨酸含量測定試劑盒

產品簡介

脯氨酸含量測定試劑盒
Pro 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,逆境條件下,植物體內Pro 含量顯著增加。Pro 增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性強的品種往往積累較多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標之一。

產品型號:
更新時間:2025-08-06
廠商性質:生產廠家
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脯氨酸含量測定試劑盒說明書
可見分光光度法 :BC0290 :50T/48S
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:4℃保存。(自備)
試劑二:液體45 mL×1瓶, 4℃保存。
試劑三:4℃保存。(自備)
標準品:脯氨酸 10mg,4℃保存。
脯氨酸(Pro)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,逆境條件下,植物體內Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性強的品種往往積累較多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標之一。
用磺基水楊酸(SA)提取Pro,加熱處理后,Pro與酸性茚三酮溶液反應生成紅色;加甲苯萃取后,在520nm測定吸光度。
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、冰乙酸、甲苯、研缽、冰和蒸餾水。
一、脯氨酸含量測定試劑盒樣品測定的準備:
1、細胞、細菌或組織樣品的制備 :
細菌或細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,棄上清;按照每100萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標準品的處理:稱取1mg,將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
二、測定步驟:
1、分光光度計預熱30min以上,調節(jié)波長520nm,蒸餾水調零。
2、取0.5mL上清液(或稀釋后的標準品)+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二于有蓋試管中,置沸水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),每10min振蕩一次。
3、待冷卻后,在試管中加入1mL試劑三,振蕩30s,靜置片刻,使色素轉試劑三;吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中,用試劑三調零,于520nm波長處比色,記錄吸光值。
4、根據標準品吸光值和濃度,建立標準曲線。
三、Pro含量計算:
1、通過標準曲線計算樣品脯氨酸含量(y為脯氨酸含量,μg/mL;x為OD值)
2、按照細菌、細胞個數或者組織鮮重計算,先根據標準曲線求得y值:
細胞或細菌中脯氨酸含量(μg/104 cell)= y÷細胞濃度(104 cell/mL)
Pro含量(μg/g mass) =y÷樣本鮮重(g/mL)
3、血清(漿)中脯氨酸含量,先根據標準曲線求得y值:
Pro含量[μg/mL血清(漿)] = y÷0.1mL血清(漿)/mL 提取液中含有蛋白沉淀劑,提取的上清液不能用于蛋白濃度的測定。

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